熒光-PCR法是利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)方式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)方式生成模板，從而進(jìn)入平臺(tái)期。將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋進(jìn)行PCR，按照起始DNA量由多到少的順序等間隔得到一系列擴(kuò)增曲線(xiàn)。Ct值與起始模板數(shù)的對(duì)數(shù)值之間存在線(xiàn)性關(guān)系，可以制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。未知濃度的樣品也得到Ct值，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，就可以求出未知樣品的起始模板量。